Lyofilisering, også kjent som frysetørking, er en prosess som brukes til å bevare biologisk materiale ved å fjerne vann fra prøven, som først innebærer å fryse prøven og deretter tørke den, under vakuum, på veldig lavt temperaturer. Lyofiliserte prøver kan lagres mye lenger enn ubehandlede prøver.
Hvorfor brukes lyofilisering?
Lyofilisering, eller frysetørking av bakteriekulturer, stabiliserer kulturene for langtidslagring, mens minimerer skaden som kan være forårsaket av strengt tørking av prøven. Mange mikroorganismer overlever godt når de lyofiliseres og kan lett rehydreres og dyrkes i kulturmedier, etter lengre tids lagring.
Lyofilisering brukes også i bioteknologi og biomedisinske næringer for å bevare vaksiner, blodprøver, rensede proteinerog annet biologisk materiale.
Denne korte laboratorieprosedyren kan brukes med en hvilken som helst kommersielt tilgjengelig frysetørker for å bevare kultursamlingen.
Prosessen
Prosessen med frysetørking er faktisk en anvendelse av et fysisk fenomen som kalles sublimering: overgangen til et stoff fra faststoff til en gassformet tilstand, uten først å passere gjennom væsken fase. Under lyofilisering fjernes vannet i den frosne prøven som vanndamp uten først å tine prøven.
Vanlige feil
En av de vanligste feilene når det gjelder lyofilisering er ikke å vite prøvenes smeltepunkt, noe som gjør det vanskelig å velge riktig lyofilisator. Prøvene dine kan smelte under prosessen. En annen vanlig feil er å tenke at kaldere er bedre når frysetørking på en hylletype frysetørker. Under primær tørking bør du stille inn hylletemperaturen til rett under prøvens eutektiske temperatur. Det skal være akkurat nok varme til å oppmuntre molekylene i prøven til å bevege seg - men forhindre smelting.
En tredje feil er å bruke feil utstyr for prøvene dine. Fordi frysetørkere brukes i gruppeinnstillinger, bør du vite følgende før du kjøper en:
- Hvor mye fuktighet vil lyofiliseres
- Hva prøven er (og den eutektiske temperaturen)
- Slik bruker du frysetørkeren ordentlig
Hvis enheten ikke brukes riktig, kan det ødelegge alle prøvene. Noe som bringer oss til en annen vanlig feil: Å ikke vedlikeholde vakuumpumpen. Pumpen må være i god stand for at lyofilisering kan fungere. Å kjøre pumpen med gassballasten åpen 30 minutter før og etter frysetørkeprosessen vil øke pumpens levetid. Åpning av gassballasten renser forurensninger ut av pumpen for å forhindre skade på interne komponenter. Du bør sjekke pumpeoljen ofte for misfarging og partikler, og skifte olje etter behov. Regelmessige oljeskift holder pumpen ved optimalt vakuum under frysetørkeprosessen.
Til slutt kan det være en stor feil å ha feil tilbehør til frysetørking for lyofiliseringsprosessen. Trenger du en stopperprøve under ditt vakuum? Da er et stoppkammer nødvendig. Fryser du tørk i kolber? Så sørg for å ha et tørkekammer med porter.
Ved å unngå feilene ovenfor kan du gi bedre pleie for frysetørreren og pumpen, og få bedre prøver når frysetørkingen din er ferdig.
referanser
Labconco News. "Topp 5 feil gjort i lyofiliseringsprosessen."