De fleste karakterene i Hamlet er statsborgere i Danmark og medlemmer av den kongelige domstol, og hjelper seg etter kongens død. Karakterene er dypt mistenksomme overfor hverandre, da det blir klart at kongen kan ha blitt myrdet - og av broren Claudius ikke mindre. Som Hamleter en tragedie, hver karakter bærer i seg selv tragisk karakteristikk som bidrar til deres egen undergang. Men det er særlig den ustabile atmosfæren til den nye domstolen til Claudius som bringer mye av handlingen til stykket.
Hamlet
Hovedpersonen i tragedien, Hamlet er en elsket prins og en gjennomtenkt, melankolsk ung mann. Forferdet over farens død blir Hamlet bare mer deprimert av onkelen Claudius etterfølgelse av tronen og hans etterfølgende ekteskap med moren. Når kongen, Hamlets far, spøkelse forteller ham at han ble myrdet av broren Claudius og at Hamlet må hevne ham, blir Hamlet nærmest selvmord og besatt av hevn. Han blir sakte drevet gal av sin manglende evne til å handle på denne instruksjonen.
Veldig intelligent bestemmer Hamlet seg for å falske galskap for å lure onkelen og de lojale mot ham mens han avdekker om Claudius er skyldig for farens død - selv om ofte hans mentale helse virkelig er i spørsmål. Han er bekymret for sin egen skyld, og Hamlet blir også hatefull, forakter onkelen, gir uttrykk for sinne mot moren, frustrert over sine forræderiske venner og fremmedgjør Ophelia (som han en gang hadde hoffet). Hans sinne grenser til hensynsløshet, og han er ansvarlig for mange dødsfall gjennom hele stykket, men han mister aldri sine reflekterende og melankolske trekk.
Claudius
Claudius, stykket motstander, er kongen av Danmark og Hamlets onkel. I følge spøkelsen til Hamlets far, er Claudius hans drapsmann. Når vi først blir introdusert for Claudius, skjenner han ut Hamlet for at han fremdeles er så tøff over farens død og forbyr ham å gå tilbake til universitetsstudiene i Wittenberg.
Claudius er en samlende strateg som forgiftet sin egen bror i kaldt blod. Han forblir kalkulerende og kjærløs gjennom hele stykket, drevet av hans ambisjon og begjær. Når han innser at Hamlet ikke er gal som han opprinnelig trodde, og faktisk utgjør en trussel mot kronen hans, begynner Claudius raskt å plotte Hamlets død. Denne planen fører til slutt til Claudius død ved Hamlets hender på slutten av stykket.
Claudius har imidlertid også en hederlig side. Når Hamlet har en reisende tropp satt på et teaterstykke for retten som etterligger drapet på en konge, avslører Claudius sin skyldfølelse. Han bestemmer seg også for å få begravet Ophelia med seremoni, i stedet for som et selvmord. Hans kjærlighet til Gertrude virker også oppriktig.
Polonius
Polonius er den viktigste rådgiveren for kongen, også kjent som Lord Chamberlain. Polonius er pulserende og arrogant, også den anmassende faren til Ophelia og Laertes. Da Laertes legger opp til Frankrike for å fortsette studiene, gir Polonius ham paradoksale råd, inkludert berømt sitat, "å være ditt eget jeg være sant" - en ironisk linje fra en mann som ikke kan holde sitt råd konsistent. Når Hamlet går til morens sengekammer og forsøker å konfrontere henne om sin fars drap, dreper han Polonius, som gjemmer seg bak et billedvev og som Hamlet gjør feil for kongen.
Ophelia
Ophelia er datteren til Polonius og Hamlets kjæreste. Hun er lydig, samtykker i å ikke se Hamlet lenger etter farens forslag og spionere på Hamlet når hun blir spurt av Claudius. Hun mener at Hamlet elsker henne, til tross for hans inkonsekvente frieri, og er ødelagt under en samtale der han ikke ser ut til å elske henne i det hele tatt. Når Hamlet dreper faren sin, blir Ophelia sint og drukner i elven. Hvorvidt dette er et selvmord, er tvetydig. Ophelia er feminin og nesten jomfru gjennom hele stykket, selv om hun er i stand til å motvirke Hamlets vidd.
Gertrude
Gertrude er dronningen av Danmark og Hamlets mor. Hun var opprinnelig gift med Hamlets far, den døde kongen, men har nå giftet seg med den nye kongen Claudius, hennes tidligere svoger. Gertrudes sønn Hamlet betrakter henne med mistanke, og lurer på om hun hadde en hånd i drapet på faren. Gertrude er ganske svak og klarer ikke å matche vits i et argument, men hennes kjærlighet til sønnen er fortsatt sterk. Hun liker også de fysiske sidene ved ekteskapet sitt med Claudius - et punkt som forstyrrer Hamlet. Etter sverdkampen mellom Hamlet og Laertes, drikker Gertrude den forgiftede bekken som var ment for Hamlet og dør.
Horatio
Horatio er Hamlets beste venn og fortrolige. Han er forsiktig, vitenskapelig og en god mann, kjent for å gi gode råd. Da Hamlet ligger døende på slutten av stykket, vurderer Horatio selvmord, men Hamlet overbeviser ham om å leve videre for å fortelle historien.
Laertes
Laertes er Polonius 'sønn og Ophelias bror, i tillegg til en klar folie til Hamlet. Der Hamlet er kontemplativ og frosset av følelser, er Laertes reaktiv og rask til handling. Når han hører om farens død, er Laertes klar til å reise et opprør mot Claudius, men søsterens galskap gjør at Claudius kan overbevise ham om at Hamlet har feil. I motsetning til Hamlet, vil Laertes stoppe på ingenting for hevn. På slutten av stykket dreper Hamlet Laertes; mens han legger seg døende, innrømmer Laertes på Claudius plan for å drepe Hamlet.
Fortinbras
Fortinbras er prinsen av nabolandet Norge. Faren ble drept av Hamlets far, og Fortinbras leter etter hevn. Fortinbras ankommer Danmark akkurat når høydepunktet er nådd. Etter Hamlets anbefaling og på grunn av en fjern forbindelse, blir Fortinbras den neste kongen av Danmark.
Spøkelset
Spøkelset hevder å være Hamlets døde far, den tidligere kongen av Danmark (også kalt Hamlet). Han fremstår som et spøkelse i de første scenene av stykket, og informerte Hamlet og andre om at han ble myrdet av broren Claudius, som helte gift inn i øret hans mens han sov. The Ghost er ansvarlig for handlingen i stykket, men dets opprinnelse er uklart. Hamlet bekymrer seg for at dette spekteret kan bli sendt av djevelen for å oppfordre ham til å myrde, men mysteriet blir aldri løst.
Rosencrantz & Guildenstern
Rosencrantz og Guildenstern er to bekjente av Hamlet som blir bedt om å spionere etter den unge prinsen for å finne ut årsaken til galskapen hans. Begge er heller spinløse og lydige - Rosencrantz moreso enn Guildenstern - og ingen av dem er intelligente nok til å virkelig lure Hamlet. Etter at Hamlet drepte Polonius, følger Rosencrantz og Guildenstern ham til England. De har hemmelige ordre fra kongen av England om å halshugge Hamlet ved ankomst, men skipet blir angrepet av pirater, og når Rosencrantz og Guildenstern ankommer England, deres hoder blir hugget av i stedet.