For at forskjellige arter skal avvike fra vanlige forfedre og drive utvikling, reproduktiv isolasjon må forekomme. Det er flere typer reproduktiv isolasjon som fører til spesiasjon. En av de vanligste metodene er prezygotisk isolasjon som finner sted før befruktning skjer mellom kl kjønnsceller og forhindrer forskjellige arter fra seksuelt reproduserende. I utgangspunktet, hvis individer ikke kan reprodusere, blir de ansett for å være forskjellige arter og avvike på livets tre.
Det er flere typer prezygotisk isolasjon som spenner fra inkompatibilitet av gameter til atferd som resulterer i inkompatibilitet, og til og med en type isolasjon som fysisk hemmer individer fra oppdrett.
Mekanisk isolasjon - uforenlighet med seksuelle organer - er sannsynligvis den enkleste måten å hindre individer i å reprodusere med hverandre. Enten det er formen på forplantningsorganene, plasseringen eller forskjeller i størrelse som forbyr enkeltpersoner å koble seg sammen, når kjønnsorganene ikke passer sammen, er det ikke sannsynlig at parring er å oppstå.
I planter fungerer mekanisk isolasjon litt annerledes. Siden størrelse og form er irrelevant for reproduksjon av planter, skyldes mekanisk isolasjon vanligvis bruk av en annen pollinator for plantene. For eksempel et anlegg som er strukturert for pollinering av bier vil ikke være kompatible med blomster som er avhengige av kolibrier å spre pollen deres. Selv om dette fremdeles er et resultat av forskjellige former, er det ikke formen til de faktiske gamene som betyr noe, men snarere uforeneligheten med blomsterformen og pollinatoren.
Ulike arter har en tendens til å ha forskjellige hekkesesonger. Tidspunktet for kvinnelige fruktbarhetssykluser kan resultere i tidsmessig isolering. Lignende arter kan være fysisk kompatible, men kan fremdeles ikke reprodusere seg på grunn av paringssesongene deres som oppstår på forskjellige tider av året. Hvis hunnene av en art er fruktbare i løpet av en gitt måned, men hannene ikke er i stand til å formere seg på den tiden av året, kan det føre til reproduktiv isolasjon mellom de to artene.
Noen ganger overlapper paringssesonger av veldig like arter noe. Dette gjelder spesielt hvis artene lever i forskjellige områder og ikke etterlater noen sjanse for hybridisering. Imidlertid har det vist seg at lignende arter som lever i samme område generelt ikke har faser med overlappende parring, selv om de gjør det i forskjellige miljøer. Mest sannsynlig er dette en tilpasningskarakter designet for å redusere konkurransen om ressurser og kamerater.
En annen type prezygotisk isolasjon mellom arter har å gjøre med atferden til individene, og spesielt oppførselen rundt parringstid. Selv om to bestander av forskjellige arter både er mekanisk og midlertidig kompatible, er deres faktisk paringsritual oppførsel kan være nok til å holde arten i reproduktiv isolasjon fra en en annen.
Paringsritualer, sammen med annen nødvendig parringsatferd - for eksempel parringssamtaler og danser - er veldig nødvendig for menn og kvinner av samme art for å indikere at det er på tide å reprodusere. Hvis parringsritualet blir avvist eller ikke anerkjent, vil ikke parring oppstå og arten blir reproduktiv isolert fra hverandre.
For eksempel blåfoten booby fugl har en veldig forseggjort parringsdans som hannene må utføre for å bevege hunnen. Hunnen vil enten akseptere eller avvise framgangen til hannen, men andre fuglearter som ikke har det samme parringsdans blir helt ignorert av hunnen - noe som betyr at de ikke har noen sjanse til å reprodusere seg med en kvinnelig blåfot Booby.
Selv veldig nært beslektede arter har preferanser med hensyn til hvor de bor og hvor de formerer seg. Noen ganger er disse foretrukne stedene for reproduksjonshendelser inkompatible mellom arter, noe som fører til det som kalles habitatisolering. Hvis individer av to forskjellige arter bor intet i nærheten av hverandre, vil det åpenbart ikke være noen mulighet til å reprodusere. Denne typen reproduktiv isolasjon fører til ytterligere spesiasjoner.
Imidlertid kan selv forskjellige arter som lever i samme sted, ikke være forenlige på grunn av deres foretrukne reproduksjonssted. Det er noen fugler som foretrekker en viss type tre, eller til og med forskjellige deler av det samme treet, for å legge eggene sine og lage reir. Hvis lignende fuglearter er i området, vil de velge forskjellige steder og vil ikke avle hverandre. Dette holder artene separate og ikke klarer å reprodusere seg med hverandre.
Gametisk isolasjon sikrer at bare sæd fra samme art kan trenge gjennom egget til den arten og ingen andre. Under seksuell reproduksjon blir det kvinnelige egget smeltet sammen med den mannlige sædcellen, og sammen skaper de en zygote. Hvis sæd og egg ikke er kompatible, kan ikke befruktning forekomme. På grunn av noen kjemiske signaler som frigjøres av et egg, er det ikke sikkert at sæden blir tiltrukket av den. En annen faktor som forhindrer fusjon er en sæd som ikke kan trenge gjennom et egg på grunn av sin egen kjemiske sammensetning. En av disse årsakene er tilstrekkelige til å frustrere fusjon og forhindre dannelse av en zygote.
Denne typen reproduksjonsisolasjon er spesielt viktig for arter som reproduserer eksternt i vann. For eksempel slipper hunnene i de fleste fiskearter ganske enkelt eggene sine i vannet i deres foretrukne avlssted. Hannfisk av den arten kommer deretter og slipper sædcellen over eggene for å befrukte dem. Siden dette foregår i et flytende miljø, blir imidlertid noen av sædcellene feid bort av vannmolekyler og spredt. Var det ingen gametiske isolasjonsmekanismer på plass, kunne sædceller smelte sammen med et hvilket som helst egg, noe som ville resultert i hybrider av uansett art som tilfeldigvis parret seg i vannet der den gangen.